Enzima que impede, durante a ligação das moléculas de DNA, a recircularização ou dimerização do vetor de clonagem. A enzima catalisa a remoção dos grupos fosfato, ligados ao carbono 5’ das extremidades do vetor de clonagem linearizado, impedindo assim o reestabelecimento das ligações fosfodiéster quando da ação da enzima DNA ligase. 